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  人多巴胺受體D1(DRD1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗說明書

  本試劑盒僅供研究使用。

  檢測范圍：96T

  2ng/L - 80ng/L

  使用目的：

  本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中多巴胺受體D1(DRD1)含量。

  實驗原理

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人多巴胺受體D1(DRD1)水平。用純化的人多巴胺受體D1(DRD1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入多巴胺受體D1(DRD1)，再與HRP標記的多巴胺受體D1(DRD1)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的多巴胺受體D1(DRD1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中人多巴胺受體D1(DRD1)濃度。

  人多巴胺受體D1(DRD1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成

  試劑盒組成
  1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標試劑 6ml×1 瓶
  3 酶標包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
  5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
  7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
  9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
  11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個

  標本要求

  1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

  2.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步驟

  1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

  2.加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

  3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

  4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

  5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

  6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

  7.溫育：操作同3。

  8.洗滌：操作同5。

  9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

  10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

  11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

  操作程序總結(jié)：

  計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

  人多巴胺受體D1(DRD1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項

  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

  3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

  4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

  8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

  保存條件及有效期

  1.試劑盒保存：2-8℃。

  2.有效期：6個月

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